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第三节 核酸检测
1.检测原理
通过核酸扩增淋球菌特异性基因片段检测淋球菌,目前主要检测技术为实时荧光PCR。
2.检测准备
核酸检测试剂盒、实时荧光PCR仪、离心机、漩涡混合器、加热仪、移液器等相关仪器设备。
3.标本采集
(1)宫颈拭子、男女性尿道拭子等标本采集方法参见培养法。
(2)尿液:在采集尿液标本前患者应至少1小时没有排尿,用无菌、无防腐剂的塑料容器收集前段尿液10~20ml。24小时以内检测的尿液,应放置于4℃冰箱保存,超过24小时检测时,应冻存于-20℃或-70℃冰箱。
(3)阴道拭子:用温盐水湿润阴道窥器,轻轻按压子宫,打开窥器,使用试剂盒推荐的采样拭子放置于阴道后穹窿10~15秒,采集阴道分泌物。
4.检测流程
(1)按照商品化试剂盒说明书进行核酸提取、核酸扩增、扩增产物检测等操作。
(2)结果判读:根据试剂盒的判读标准,判断是否检测到淋球菌核酸。
5.结果报告
(1)阳性。
(2)阴性。
6.临床意义
(1)淋球菌核酸检测阳性,结合临床表现和流行病学史,可作为泌尿生殖道部位淋球菌感染诊断的依据。泌尿生殖道外标本可能存在的其他奈瑟菌,会导致交叉反应产生假阳性结果,需谨慎解读检测结果。
(2)由于核酸检测敏感性较高,菌株死亡的后残留物在2~3周内也可被核酸扩增检测出阳性结果。应用于临床判愈试验时应在完成治疗后3周以上进行。
7.注意事项
(1)试验复杂性和质控要求较高,需要经过培训的专业人员进行操作。
(2)此方法在临床上开展存在一定的局限性,如缺少纯培养的标本,导致无法开展药敏试验。