中药化学成分程序化分离制备
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2.2 大黄

大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim. ex Balf.或药用大黄 Rheum officinale Baill.的干燥根和根茎,具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经、利湿退黄的功效。大黄的主要活性成分有蒽醌类、二蒽酮类、茋类、鞣质和多糖等。药理研究表明,大黄蒽醌类成分具有泻下、调节胃肠功能、抗病原微生物等药理作用,其中主要活性成分包括大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚等。

【主要化学成分与结构】

【主要化学成分提取、分离】[2,3]
(1)分离方法一

图2-4 大黄粗提物的制备HSCCC分离图[2]

HSCCC条件:柱体积260mL;溶剂系统,1%NaH2PO4∶1%NaOH=(100∶0)~(0∶100),
上相作为固定相,下相作为流动相,流速2mL/min,进样量120mg,固定相保留率40%。
Ⅰ—大黄酸;Ⅱ—桂皮酸;Ⅲ—大黄素;Ⅳ—芦荟大黄素;Ⅴ—大黄酚;Ⅵ—大黄素甲醚

图2-5 大黄粗提物的HPLC分析图[2]

HPLC条件:SPHERIGEL ODS C18(4.6mm×250mm,5μm),紫外检测波长254nm,
柱温25℃,流速1.0mL/min,进样量10μL;流动相:A(0.1% H3PO4),
B(甲醇),0~3min,57%B;3~20min,57%~90%B;20~40min,90%B

(2)分离方法二

图2-6 大黄粗提物的pH区带逆流色谱图[3]

pH区带逆流色谱条件:石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶7∶4∶6,体积比);上相加10mmol/L三氟乙酸,
下相加15mmol/L NaOH,转速850r/min,流速2.0mL/min,进样量1.3g,检测波长254nm。
1—桂皮酸(140mg,96.1%);2—芦荟大黄素;3—大黄酸(130mg,92.5%);4—大黄素

图2-7 pH区带逆流色谱尾吹部分的常规HSCCC色谱图[3]

HSCCC条件:石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(7∶3∶7∶4,体积比);转速850r/min;
流速2.0mL/min;进样量260mg;紫外检测波长254nm;固定相保留率65.5%。
1—桂皮酸;2—芦荟大黄素(60mg,94.6%);4—大黄素(98mg,96.5%)