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2.2 原材料
玉米秸秆收集于内蒙古自治区呼和浩特市。蒸汽爆破预处理:玉米秸秆在3L蒸汽爆破器中于1.9MPa下保温9min后瞬间喷放,爆破料经充分洗涤后作为产酶碳源和酶水解底物,4℃冰箱保存备用;绝干蒸汽爆破玉米秸秆含纤维素45.1%、木聚糖3.9%、木质素23.2%。稀酸预处理:玉米秸秆于0.75%(质量分数)的稀硫酸、121℃下处理1h,洗涤后作为产酶碳源和酶解底物,4℃冰箱保存备用;绝干稀酸处理玉米秸秆含纤维素60.1%、木聚糖6.6%、木质素25.2%。
自产纤维素酶产酶菌株为里氏木霉Rut C30,商品纤维素酶购自Sigma公司(上海),其滤纸酶活和β-葡萄糖苷酶酶活分别为128.10FP IU/mL和27IU/mL。SDS-PAGE凝胶电泳的储存液和缓冲液包括:丙烯酰胺凝胶贮备液、分离胶缓冲液、浓缩胶缓冲液、电极缓冲液、样品溶解液、10%过硫酸铵、N,N,N′,N′-四甲基乙二胺(TEMED)、固定液、考马斯亮蓝R-250染色液和脱色液。双向电泳分析的实验试剂包括:水化上样液、胶条平衡缓冲液母液、电泳缓冲液、琼脂糖封胶液、固定液、敏化液、硝酸银染色液、显色剂和终止液。