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第2章 纤维素酶的制备
2.1 引言
木质纤维生物质是世界上最丰富的可再生资源,其生物量是淀粉质原料的1000倍,而人类对其利用率不足10%。我国的木质纤维原料中仅农作物秸秆和皮壳,每年产量就达7亿多吨,林业副产品、城市垃圾和工业废物数量也很可观。木质纤维原料中的纤维素可被纤维素酶降解为葡萄糖,而葡萄糖是发酵工业和许多化学工业及其他工业部门的重要原料,在这一过程中,纤维素酶生产费用是最昂贵的,大约占燃料乙醇生产总成本的40%[1]。里氏木霉(Trichoderma reesei)是国际上公认的纤维素酶生产菌株之一,也是植物纤维原料生物转化制取燃料乙醇工艺中最具工业应用前景的微生物[2]。因此,里氏木霉利用廉价的木质纤维生物质作为碳源,制备适用于可再生能源生产需要的高催化活性、低成本的纤维素酶,是目前生物质能源研究领域的热点。
下面以里氏木霉Rut C30为产纤维素酶菌株,蒸汽爆破玉米秸秆、纸浆和稀酸预处理的玉米秸秆为碳源制备纤维素酶,比较不同碳源纤维素酶的酶活的差异;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向电泳技术,分析不同碳源制备的纤维素酶蛋白表达的差异,根据等电点和分子量与前人纯化的里氏木霉分泌蛋白数据匹配,寻找自产纤维素酶与商品纤维素酶蛋白在糖化性能上的差异。