22．怎样生产和使用平菇液体菌种？

我国最早于60年代(陈聿美等，1963)试用深层培养(液体培养)平菇、香菇、草菇等15种食用菌的菌丝体，并取得成功。其后，上海师范大学杨庆尧教授等进一步将其完善、定型，并在平菇、香菇等食用菌栽培上推广利用。

介绍一种浅层培养平菇液体菌种的工艺：

(1)准备菌种。平菇母种若干支。

(2)配制培养基。

配方一：蛋白胨2.0克，酵母膏2.0克，硫酸镁0.5克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二钾1.0克，葡萄糖20克，加清水至1000毫升。

配方二：蛋白胨2.0克，硫酸镁0.5克，磷酸二氢钾0.5克，硫酸钙0.1克，维生素B110微克，加清水至1000毫升。

配方三：玉米粉60克，维生素B110微克，先将玉米粉加入适量开水中搅成玉米糊，然后加清水至1000毫升，加入维生素B1。

将配制好的任何一种培养基分装于250毫升三角瓶中，每瓶50～100毫升，加棉塞或硅橡胶塞后置于121℃、0.11兆帕的条件下灭菌20分钟，冷却后接种。

(3)接种培养。按无菌操作要求，每支母种接种4～6瓶。接种后置于恒温摇床上，在25℃、125转/分钟条件下培养4～6天，合格者即为一级种子液。

(4)质量检查。摇培过程中或摇培结束后，均应进行质量检查。若培养液变混浊、有酸臭味，表示已被细菌污染；若培养液有霉味，菌丝球异常，表示已被真菌污染。将污染的培养物重新灭菌后倒掉，以免污染环境。将具有平菇香味，菌丝球颜色白、球形正常的液体菌种镜检后立即应用于下一步生产，或置4℃条件下短期贮存。

液体菌种使用方法：液体菌种(一级种子液)的用途有三种：

(1)用来扩大生产二级种子液，用量为5%(体积比)，培养基配方及生产方法同上。

(2)用来扩大生产原种或栽培种(普通棉籽壳培养基或木屑培养基)，每瓶(袋)用种量为5～10毫升。可用刻度吸管(事先灭菌备用)或5毫升进样器作为接种工具，转接液体菌种。

(3)用作栽培种，每袋用种量为15～30毫升。

没有恒温摇床的单位，每天用人工振荡4～6次，每次30秒左右，也可收到同样的效果。如果用发酵罐或5～10升血清瓶通气培养(深层培养)，则可大量生产液体菌种。