二、样本采集及处理

1.血样采集

（1）采血前准备：

检查所需物品是否已备齐，受检者信息与样本容器表面的标记是否一致，并注明病人姓名和唯一编码。

（2）样本的编码和记录：

应制订样本编码的标准操作程序（standard operating procedure，SOP），可采用年流水号登记检测血样，或直接使用病人条码作为样本唯一性编码，保证其唯一性。应使用专门的样本记录本（表）记录样本信息，或与医院报告系统连接，录入电脑保存。

（3）样本的采集

1）按照临床采血技术要求操作采集抗凝全血或末梢全血，遵守生物安全相关要求。

2）血浆分离：将采集的抗凝全血用1 500～3 000r/min离心15min，吸出上层血浆，置于冻存管中保存。

3）血清分离：用不含抗凝剂的真空采血管抽取5～10mL静脉血，于室温放置1～2h，待血液凝固、血块收缩后用1 500～3 000r/min离心15min，吸出上层血清置于冻存管中。

4）滤纸干血斑：用移液器吸取100μL抗凝全血（或血浆），对准滤纸印圈的中心处，将样本缓慢滴在滤纸（如Whatman903滤纸干血斑采集卡）上，避免产生气泡。或用将穿刺后自皮肤伤口贴住滤纸印圈的中心直至流出的末梢血填满整个采血圈。于室温下自然干燥4h以上（潮湿气候下干燥24h以上），不要在太阳下晾晒或加热，干血斑不能互相堆叠或与其他界面接触。每个样本制作3个以上的干血斑，保存备用。

5）采血完成后的穿刺针头必须丢弃于放置尖锐危险品容器内。采血针和分离血清或血浆后的剩余血样高压灭菌后妥善处理，防止发生职业暴露。

2.样本的保存

（1）用于抗体和抗原检测的血清或血浆样本，1周以内进行检测的可存放于2～8℃，1周以上应存放于-20℃以下。

（2）用于CD4+T淋巴细胞检测的全血样本，室温保存时间不超过48h，采用CD45设门检测样本，保存时间不超过72h。

（3）用于核酸检测的血浆样本，建议在采血后4h内分离血浆。分离后的血浆，4d内进行检测的可存放于4℃，3个月以内检测的应存放于-20℃以下，3个月以后检测的应置于-70℃以下保存。

（4）滤纸干血斑充分干燥后，单独放入密封袋中保存，避免血斑堆叠造成相互污染，放入干燥剂及湿度指示卡后密封保存。

（5）筛查阴性样本，可根据具体需要决定保存时间，建议至少保存1个月。

（6）筛查阳性样本应及时分离血清或血浆，按照国家生物样品管理有关规定-20℃以下暂存并通知病人采集第二份血样。在采集第二份血样时核实病人身份信息后采样，检测结果仍阳性的样本，分离血清或血浆后与第一份血样一起上送艾滋病确证实验室进行补充试验。

3.样本的运送

（1）全血、血浆的运送应符合生物安全要求，参照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》。

（2）用于补充实验检测的血清或血浆样本，1周以内进行检测的于2～8℃冷藏运输，1周以后进行检测的应在冷冻保存条件下运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样本应在室温下（18～25℃）运送，不可冷藏。用于病毒载量检测的样本应在-20℃以下运输，运输过程中避免冻融。

（3）运送样本必须有交接记录，需由经过生物安全培训的专业人员用专车送往上级实验室。

4.样本的接收

（1）样本必须在艾滋病检测实验室内由专业人员打开，确认样本与送检单信息一致后收样。

（2）检查样本的状况，记录血液样本有无影响检测的情况：抗原抗体检测血样有无严重溶血、血脂过多、微生物污染以及黄疸；CD4+T淋巴细胞检测的全血有无凝块或溶血；核酸检测的血浆样本是否冻融等。如果样本不符合检测要求，立即通知送样实验室，要求重新采集样本上送。

（3）接收样本时应填写样本接收单，送样单位签字确认。