第二节 妇产科疾病的标本采集与处理
临床医生在详细了解患者的基本病情后,根据病情需要开具相应的检查申请单。送检的各种临床检验与病理标本的质量对检查结果有着重要影响,医护人员需向患者告知检查目的、标本采集时的注意事项和采集时间,落实标本采集的患者准备。
一、血标本的采集与处理
适用于检验科及临床科室所需做血常规、生化、免疫、凝血功能等检验项目的血标本采集。
(一)血液标本采集前的准备
1.告知患者静脉采血的时间
在采血的前一天晚间和采血当日早晨应避免剧烈运动,采血前应休息10min。采血时,患者要保持相对安静和情绪稳定。冬季采血时应要求患者在室内休息10min后采血,以保证检验结果的准确性。多数试验,采血前应空腹8~12h,避免某些饮食成分影响检测结果。某些用药患者根据具体情况,尽量避免药物干扰。
2.患者准备
采血前应向患者做适当的解释,以消除患者的疑惑及恐慌,如血气分析采血前及采血时,患者应消除恐惧心理。因为通气过度是血气误差的一个主要原因,它可使PCO2下降、PO2上升、pH偏碱,故采血时患者安静是一个重要条件。体位影响血液循环,血液和组织间液因体位不同而产生平衡改变,其中细胞成分和大分子物质的改变较为明显,所以住院患者与门诊患者检查的结果会有所差别。故采集标本时要注意保持正确的体位和体位的一致性。静脉采血多采用卧位或坐位,门诊患者常采用坐位。
3.口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)、胰岛素释放试验、C-肽释放试验等
WHO推荐的标准化OGTT为:①试验前3d,受试者每日食物中含糖量不低于150g,且维持正常活动,停用影响试验的药物(如胰岛素)。空腹10~16h后,坐位抽取静脉血,测定血葡萄糖浓度为空腹血浆葡萄糖(fasting plasma glucose,FPG)。②将75g无水葡萄糖(或82.5g含1分子水的葡萄糖)溶于250~300ml水中,5min之内饮完。服糖后,每隔30min取血1次,测定血浆葡萄糖浓度共4次,历时2h(必要时可延长血标本的收集时间,可长达服糖后6h)。整个试验过程中禁止吸烟、喝咖啡、喝茶、饮水及进食。
4.血脂检测
应在禁食12h后抽血。因血脂检测易受饮食情况和年龄、性别等多种因素的影响,受检者最好于采血前2周尽量保持正常的生活习惯和饮食习惯。患者若服用降血脂类药,需在检查前24h内停止服用,以保证结果的准确性。
(二)血标本的采集与处理方法
1.标本采集人员
正确掌握静脉血的各种检验标本的采集方法,以减少分析前因素对检验结果的影响,确保检验结果的准确性。
采血前应核对受检者姓名、性别、年龄、住院号/ID号及检验项目,明确标本要求。扎止血带采血时间宜在1min内完成,如超过1min可使检验结果升高或降低;严禁止血带结扎过紧、过久或血流不畅时过度挤压,以避免溶血。不能在输液的同侧采血。正确的方法是在输液的对侧采血,如两侧均在输液者应在远心端采血。禁止从输液管内直接放血,因输液成分可影响检测结果和导致血液稀释。
2.真空管多管采血的顺序
按真空采血管盖颜色依次为蓝色、黑色、黄色、红色、浅绿色、绿色、紫色、珍珠白色、灰色;如有血培养则在蓝色管前采血;如用蝶翼针采血仅有蓝色管则应在蓝色管前加一无添加剂的白帽真空管。必须正确选用真空管采血管,例如用含乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝剂真空管采集的血液不能用于电解质项目的检测。
3.血标本采集后的处理
①血常规、血凝、血沉等抗凝用血,在采血后应立即将试管轻轻颠倒混匀6~8次,使血液与抗凝剂充分混匀;②如进行葡萄糖耐量试验、胰岛素释放试验、C-肽释放试验等检查时,应用适当方式在真空采血管上注明采血时间及顺序。
采集完毕的标本按医院制定的标本采集运转要求及时达检验科。
二、尿液标本的采集与处理
适用于做尿液常规分析、尿液沉渣分析、尿液生化分析和尿液培养等项目的尿液标本采集。
(一)尿标本采集前的准备
1.物品准备
一次性清洁干燥尿杯、一次性带盖的塑料试管、一次性带盖的无菌尿培养杯。在一次专用塑料有盖尿杯或尿管粘贴上项目信息条形码。
2.患者准备
应在采集前一天向受检者提供留取尿液的容器,告知留取尿液的方法、留尿时间、注意事项等。采尿前患者应先洗手,用消毒小布巾或清水清洁尿道口和周围处;患者开始排尿时将前段尿排入便盆或厕所,收集中段尿于清洁干燥的容器中,多余的尿排入便盆或厕所;如患者不能执行所推荐的方法,需要帮助时,帮助者应戴手套。需导尿留取标本的患者:由临床医护人员告知患者,其导尿操作术也由临床医护人员完成,从导出的尿液中留取部分尿液于清洁干燥的容器内。
(二)尿液标本采集及处理方法
1.标本留取时间
(1)首次晨尿:清晨起床后,在未进早餐和做其他运动之前排泄的尿液,较浓缩,条件恒定,易检出异常,便于对比。
(2)随机尿:无需患者做任何准备的尿液,称为随机尿。此类标本容易获得,但受饮食、饮水、输液、剧烈运动等多种因素影响,病理成分容易漏诊。仅适用于门诊、急诊患者的常规筛查检验。
(3)24h尿:患者于早晨8点排空膀胱的尿液,再收集以后24h内所有尿液标本。从中留取送检尿液标本10ml,并注明总尿量。
(4)特殊检查如尿妊娠试验、尿糖定性试验一般应留取空腹晨尿送检。
一般定性分析测定,可在任意时间留取标本。常规定性分析,多采用首次晨尿。许多定量分析需收集24h尿液。微生物检验的标本应取中段尿并立即送检。
2.标本采集后处理
尿液标本采集后应尽快送检,最好2h内分析;12h或24h尿液标本应置2~8℃冰箱冷藏,在收集全部尿液标本后混匀,并测量尿液总量,取10ml尿液及时送检。
药物可影响检测结果,如静脉滴注大剂量先锋霉素会导致尿液白细胞结果假阴性。
三、粪便标本的采集与处理
适用于做粪便常规、粪便培养及其他检验项目所需的粪便标本采集。
(一)患者准备
患者检查前宜食用清淡饮食,腹泻及发热患者做细菌培养应在使用抗生素前。
(二)容器
使用一次性粪便有盖采集盒或采集杯。
(三)粪便标本的采集与处理
在一次性粪便采集杯粘贴上项目信息条形码,发放给患者,并告知患者用采集杯中的采集棒挑取粪便标本留取粪便标本3~10g左右(指头大小),如为水样便,直接将粪便放入一次性粪便采集杯中,盖紧杯盖送检。
(四)注意事项
1.粪便标本应留取新鲜粪便的病理成分,如黏液、血液(红色或黑色部分),若无病理成分,可多部位取材。
2.细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其他化学药品。
3.阿米巴滋养体检测应注意标本保温并立即送检,立即检测。
4.送检粪便标本应留取新鲜粪便,不得混入尿液和其他成分,禁止从尿布或卫生纸上取粪便标本。
5.要防止粪便的干燥、污染容器外壁及检验申请单等。
四、微生物标本的采集与处理
标本可来源于血、尿、便、胸腹水、骨髓、分泌物及伤口等,详见表1-1。
表1-1 微生物标本的类型及采集方法
续表
五、腹水标本的采集与处理
(一)腹腔穿刺术前准备
1.物品准备 腹腔穿刺包(内有弯盘1个、止血钳2把、组织钳1把、消毒碗1个、腹腔穿刺针1个、无菌洞巾、无菌纱布2~3块、棉球、无菌试管数支、5ml、20ml或50ml注射器各1个、引流袋1个)、口罩、帽子、无菌手套、碘伏、棉签、胶布、2%利多卡因、记号笔。
2.患者准备 向患者及家属解释操作目的,签署同意书。
3.核对患者床号、姓名、性别、年龄,嘱排空尿液以防刺伤膀胱,测量血压、脉搏。
4.穿刺点的选择 ①左髂前上棘与脐连线中外1/3交界点(此处可避免损伤腹壁下动脉,肠管较游离不易损伤,放腹水时通常选用此处);②脐与耻骨联合连线中点上方1cm偏右或偏左1~1.5cm(此处无重要器官且容易愈合,穿刺较安全);③侧卧位,脐水平线与腋前线或腋中线之延长线相交处(多适用于腹水较少时诊断性穿刺);④腹水量少或有包裹性分隔时,须在超声引导下穿刺(可用记号笔在穿刺点皮肤上做标记)。
(二)操作程序及步骤
1.操作者洗手,戴口罩、帽子。
2.常规消毒,戴无菌手套,铺无菌单,5ml注射器抽取2%利多卡因2ml自皮肤至腹膜壁层作局部麻醉(麻醉皮肤局部应有皮丘,注药前应回抽,观察无血液、腹水后,方可推注麻药)。
3.左手固定穿刺部位皮肤,右手持穿刺针,经麻醉处垂直刺入腹壁,至阻力感突然消失时,示已进入腹腔,即可抽取和引流腹水(诊断性穿刺可直接用20ml或50ml无菌注射器和7号针头进行穿刺),留取腹水标本于无菌试管中送检(抽取的第一管液体应舍弃)。腹水常规需要4ml以上;腹水生化需要2ml以上;腹水细菌培养需要在无菌操作下将5ml腹水注入细菌培养瓶;腹水病理需收集250ml以上。注意:生化检测管应用肝素钠抗凝,否则纤维蛋白析出造成总蛋白结果偏低且有可能引起生化仪加样针的堵塞。
4.抽液完毕拔针,盖纱布,以手按压数分钟,再用胶布固定;大量放液后,应束多头腹带加压,以防腹压骤降、内脏血管扩张引起血压降低或休克。
5.术中、术后严密观察并做好记录。
6.整理用物,填写检查单并送检。
(三)标本送检
标本采集后为防止细胞变性出现凝固或细菌破坏溶解等,必须立即送检。低温条件2~8℃运输。但微生物检验标本室温保存,不应置于冰箱内(表1-1),以免细菌死亡而导致假阴性结果。
六、阴道分泌物及脱落细胞学标本的采集与处理
(一)阴道分泌物标本的采集与处理
阴道分泌物标本采集前24h应禁止性生活、阴道灌洗及局部用药等。经期的女性患者不宜进行阴道分泌物检查。
取材所用消毒的刮板、吸管或棉拭子必须清洁干燥,不粘有任何化学药品或润滑剂。阴道窥器插入前必要时可用少许生理盐水湿润。根据不同的检查目的可自不同部位取材。一般采用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材。将分泌物使用无菌棉签采集,一个棉签放入试管内,另一个棉签涂制成薄片后送检。
阴道清洁度检查:标本采集时应防止污染,用新鲜标本涂片,如果怀疑患者有滴虫感染时,注意保温送检。
(二)阴道脱落细胞学标本的采集与处理
检查前48h内禁止性生活,避免阴道冲洗及局部用药。避开月经期。
1.制备宫颈刮片的标本采集方法
(1)充分暴露宫颈,以宫颈外口为圆心,在宫颈外口鳞柱上皮交界处和宫颈管内,用特制刮板或宫颈刷轻轻刮取或刷取1~2周。
(2)阴道不规则流血或白带过多者,用无菌棉棒轻轻拭净出血或分泌物,再取材。
(3)将刮下的细胞立即一次性涂抹于干净载玻片上,顺同一方向轻轻均匀摊平于玻片,切忌来回涂抹。
(4)在玻片磨砂端写明患者姓名/编号。
(5)立即将涂片置于95%乙醇固定至少15min。
(6)从95%酒精中取出玻片,晾干,放于自封袋或切片盒内送检。
2.制备液基细胞学片的标本采集方法
(1)充分暴露宫颈,将采样器的毛刷中央部分轻轻插入宫颈管,按同一方向旋转5~10圈(切忌来回转动)。
(2)阴道不规则流血或白带过多者,用无菌棉棒轻轻拭净出血或分泌物,再取材。
(3)将毛刷置于装有保存液的专用瓶内,漂洗采样器毛刷,上下反复的将采样器推入瓶底,迫使毛刷部分散开,共10次;最后在溶液中快速转动采样器以进一步将细胞样本保存下来,拧紧瓶盖。
(4)在标本瓶标签上写明患者姓名、年龄、取样日期,并和申请单核对无误送检。
七、活检病理标本的采集与处理
(一)标本采集与送检
妇科活检病理标本一般包括较小的活组织检查(如宫颈活检、子宫内膜诊刮等)、手术切除标本送检(如子宫全切、卵巢癌根治切除等)。
所有标本均应及时、完整地送至病理科,并标记标本离体时间。原则上,临床医师不应对送检组织标本进行剖检。如果是大标本,离体后在手术台旁剖检,应遵照剖检的改刀规范要求(不能随意切取),且能保证标本完整合拢或归位复原,不影响病理科规范检查和取材。
任何标本离体后均应快速或及时固定(不超过1h)、标记清楚,固定容器内加入5~10倍于标本体积的中性甲醛溶液,并注明固定时间。所有标本送检时,均应同时提供书写或打印清晰的、与标本吻合的检查申请单或电子申请单(附件1)。病理检查申请单应包括患者的主要临床信息(包括姓名、性别、种族、年龄、重要病史及检查结果、手术所见、病变部位、送检标本部位及数量)、临床诊断、特殊检查要求等。移送标本时,必须确保安全,防止标本容器倾覆、破损和标本丢失等。
病理科标本接收处设有专人检查核对送检标本及申请单。验收合格的申请单和标本,由病理科值班人员编号、登记。遇有下列情况,病理科将拒收:申请单与相应标本未同时送达;申请单内容与送检标本不符;标本或容器上缺乏必备标记(如患者姓名、ID等);申请单缺乏必备项目(如患者姓名、ID等);标本严重自溶、腐败、干涸等。
(二)标本的固定和预处理
标本验收人员对已验收的标本可酌情更换适当的容器,对于体积大的标本,由具备相应资质的病理工作人员在不影响主要病灶定位的情况下,及时、规范地予以剖开,以便充分固定。样本的固定时间应为6~48h,以保障固定液的充分渗透和固定。
(三)标本的大体检查、组织学取材和记录、标本留存
各种组织标本的检查、取材和记录,由具备相关资质的病理工作人员按相应规范进行。取材后剩余的标本,至少保留至病理报告签发后两周(小标本)~1个月(根治大标本)。
(四)手术中快速冰冻标本的送检
临床医师应知晓术中病理诊断的局限性:比如术中检查时间紧迫,仅能选取很少量组织检查,不能保证充分取样;术中标本冷冻过程可产生人工假象及导致组织损坏,致使诊断困难甚至无法诊断;术中病理诊断难以进行必要的特殊检查(如免疫组织化学)。手术前必须向患者或其授权人说明手术中病理会诊的意义和局限性等,患者或其授权人应在医院制定的相应《知情同意书》上签署理解和同意的意见,并签名。
择期手术者,妇产科应于术前一天向病理科递交术中冰冻病理申请单,填写患者的病史、影像检查结果、实验室检查结果和需要病理医师特别关注的问题等;应尽量避免临时申请冰冻/快速病理检查。所有手术中病理诊断均为急会诊,病理医师需按急会诊的原则,依次处理收到的术中病理标本。病理医师根据实际情况和适应证,确定采取大体检查、冷冻切片检查、涂片或印片检查、快速石蜡切片检查等方法中的一种或数种。
术中病理会诊以医疗安全和患者安全为首要原则,其适用范围应有严格限制:判断术中病理诊断必要性的核心标准为是否系术中进一步处理所必需。不应仅仅由于希望提早知道病理诊断等理由申请术中病理检查。病理医师与手术医师宜交流沟通,以确定拟送标本是否适合行术中病理检查。不宜行术中病理检查的标本主要包括:术中病理检查可能导致无法获得永久石蜡切片病理诊断的标本,包括穿刺标本、过小的标本、脂肪组织和钙化组织标本;需要广泛取材,或依据核分裂象计数,或术前活检已提示需要详尽的伴随检查才能明确肿瘤类型和性质的标本;需根据生物学行为而不能依据组织形态判断良恶性的肿瘤;已知具有传染性的标本(如结核病、病毒性肝炎、HIV等);超出术中冷冻切片检查时间和人力限制的标本。涉及截肢或其他毁损性根治手术者,其病变性质宜于手术前通过常规病理检查确定,不宜单纯根据术中病理诊断决定治疗方案。
病理医师应力争在最短时间内发出术中诊断报告,一般要求半小时内完成报告。对于难以诊断/无法诊断的病例,应及时通知手术医师。
八、临床病理联系
妇产病理诊断不是独立于临床之外的单纯形态学判断,必须密切联系临床,无论是常规活检病理诊断,还是术中快速冰冻诊断,做出正确诊断都应参考临床相关表现或特征,因此送检标本时,应提供主要临床信息,如患者年龄、月经及孕产史、临床症状体征及术中所见等。病理医师做出诊断前,应主动了解临床病史和/或术中所见。有关病理诊断的问题或病理诊断与临床诊断不吻合且临床医师有疑问时,应主动与签发报告的病理医师沟通,必要时提请相关专家或多学科会诊。对于临床就病理学诊断提出的询问,病理医师应给予专业的解释和答复。医院和病理科应制定临床-病理交流的制度并实施,如:定期举办CPC或MDT讨论会。通过讨论会,临床可以对患者病情进行集中、系统分析,结合患者的疾病分期、家庭经济状况及其身体状况和心理承受能力,在权衡利弊后确定科学、合理、规范的最佳治疗方案。这不仅能整合医疗资源,为患者提供最佳的个体化诊疗,还可以促进医院相关专业的协同发展。
附件1:病理标本送检单模板
XX医院病理标本检查申请单
(刘爱军 张 葵 李 洁)
小结
妇产科疾病的诊断和治疗与临床检验、病理检查密切相关,熟悉与之相关的检验检查,正确判读检验检查结果有助于对妇产科疾病的正确诊治。送检的各种临床检验与病理标本质量对结果的有着重要影响,是能否获得准确检验检查结果的前提,应重视各类标本的采集与处理。