5.16　虫草素的提取及纯化工艺

虫草素的提取，是根据虫草素溶于水、热乙醇和甲醇的性质，采用水、60％乙醇、乙醇和甲醇等作溶剂进行的。除直接进行提取外，还可先用乙醚脱脂，再进行提取。提取方法主要有浸提法、回流法、渗漉法、超声法、微波法、索氏提取法和超临界萃取法等，不同的提取原料适用的方法不同。多个研究表明，对于蛹虫草菌丝体而言，浸提法耗时过长，且提取效果一般，不利于下一步试验的进行；超声波提取法快捷、简便且准确度高，受试验环境、仪器人员条件等因素的限制少，具有较高的提取效率；微波法要好于超声波提取法，常用微波-超声波协同提取；超临界萃取法虽然有较好的效果，但成本高，需要特殊设备。

虫草素的纯化，是将蛹虫草菌培养液经过滤后用活性炭吸附，再经过洗脱液洗脱和浓缩，最后得到虫草素晶体。这种方法工艺简单、成本低，但吸附选择性差、得率低。目前虫草素分离纯化比较常用的方法是离子树脂吸附法、硅胶柱层析法、超临界萃取技术等。离子树脂吸附法的关键在于筛选吸附能力较强及吸附量较多的树脂和优化洗脱方法。目前多用732阳离子交换树脂，但所提取的虫草素较少，提取率较低。采用反吸附不交换的方法，即首先调pH使虫草素不被离子树脂吸附，而无关的离子均被离子树脂吸附，除去干扰成分；然后调pH使虫草素被吸附在柱体上，再经洗脱后获得虫草素结晶，可得纯度较高的虫草素晶体。大孔吸附树脂也用在了虫草素的分离纯化中。用大孔吸附树脂和硅胶色谱柱成功分离鉴定出9种化学成分，其中包括虫草素；采用DM130大孔吸附树脂，然后用聚酰胺柱层析，得到了纯度95％以上的虫草素晶体。采用超临界萃取得到虫草素晶体，纯度为50.0％～99.9％，该技术无污染，易操作，不损害活性天然成分的结构，但成本比较高。