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第一节 显微镜检查
1.检测原理
淋球菌为革兰氏阴性双球菌，菌体呈肾形成对排列，凹面相对，直径为0.6～0.8μm。男性淋病患者的泌尿生殖道分泌物经涂片革兰氏染色后，镜下可见染成红色的革兰氏阴性双球菌。
2.检测准备
显微镜、革兰氏染色液、载玻片等。
3.标本采集
男性尿道分泌物：有脓性分泌物者可直接用拭子取尿道口脓性分泌物；无明显脓性分泌物者，取材前1小时内不应排尿，用男性采样拭子插入尿道2～3cm，以旋转方式轻轻转动并保留5～10秒后取出。
4.检测流程 （1）涂片：
将拭子在载玻片上轻轻滚动涂片。
（2）固定：
室温下待涂片在空气中自然干燥后，经火焰固定。
（3）革兰氏染色 1）初染：
第一液初染剂（结晶紫）染色1分钟，随后水洗。
2）媒染：
第二液媒染剂（碘液）染色1分钟，随后水洗。
3）脱色：
第三液脱色剂（95%乙醇）脱色10～30秒至无紫色脱落为止，随后水洗。
4）复染：
第四液复染剂（苯酚复红或沙黄）染色30秒后水洗，自然干燥后镜检。
（4）镜检：
自然干燥后的载玻片滴加香柏油，先在低倍镜下找到视野后转换成100倍油镜观察结果。
（5）结果判读：
油镜下观察是否有染成红色的、具有特征形态的革兰氏阴性双球菌。
5.结果报告
（1）多形核白细胞内可见革兰氏阴性双球菌。
（2）多形核白细胞内外未见革兰氏阴性双球菌。
（3）多形核白细胞外可见革兰氏阴性双球菌。
6.临床意义
（1）显微镜下观察到多形核白细胞内存在革兰氏阴性双球菌对男性急性淋菌性尿道炎患者具有诊断价值；如果仅在多形核白细胞外见到形态典型的革兰氏阴性双球菌，需要进一步培养确认。
（2）不推荐采用显微镜检查法对其他类型的标本进行诊断。
7.注意事项
（1）涂片时不宜用力涂擦，防止细胞破裂后细菌从细胞中逸出。
（2）涂片不宜过厚，脱色时间应根据涂片厚薄作适当调整。
（3）固定时只需将涂片迅速通过火焰2～3次，以加热的涂片背面放到手背上感到不烫为宜。
（4）过度脱色会导致革兰氏阳性菌染成革兰氏阴性菌。
（5）染色后的载玻片用吸水纸吸干水分，而不是擦干玻片。