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二、高龄女性生育力评估指标解读
1.年龄
年龄是评估女性生育力最常用、最直接、最关键的指标。高龄女性生育力随年龄增长而下降。女性生育力从35 岁开始明显减退,37岁后减退更为迅速。35岁以上女性生育力低下的发生率可达30%~50%。高龄女性因年龄增长导致的不孕率升高,主要与卵子数量减少、质量下降有关,年龄25~34岁妊娠率最高可达65%,35~40岁为40%~50%;>35岁开始下降,≥40岁成功率在10%左右,且活产率明显下降,超过45岁妊娠率极低,胚胎染色体异常导致的子代畸形和先天异常发生率显著增加。但是单纯年龄因素并不能完全反映卵巢功能的真实状态,例如多囊卵巢综合征和卵巢早衰患者。因此,需要借助其他指标准确评估卵巢储备功能。
2.生化指标
(1)基础FSH(bFSH)水平:
指月经第2~3 天的血清FSH 水平,bFSH 随年龄的增长而升高。不同实验室之间bFSH 的参考值范围略有差异,通常认为bFSH 水平≤10IU/L,提示卵巢储备功能正常;连续两个周期bFSH 水平>10~15IU/L,预示卵巢功能不良;bFSH值连续两个周期>20IU/L提示卵巢功能衰竭隐匿期;bFSH值连续两个周期>40IU/L,提示卵巢功能衰竭 [1]。bFSH 检测简单易行,但是单用bFSH 不能预测卵巢反应性及妊娠结局,应结合其他指标评估。有研究发现bFSH 升高的患者IVF 周期取消率显著增加,获卵率、临床妊娠率及活产率均明显降低,10IU/L<FSH≤20IU/L,IVF的妊娠率为16.5%,一次测定FSH≥20IU/L时,妊娠率为6.5%,多次测定均≥20IU/L,无一例妊娠 [2]。因此对bFSH>20IU/L 的患者一般不建议直接进行IVF 治疗。
(2)基础FSH/LH 比值:
指月经第2~3 天的血清FSH/LH 的比值。高龄女性由于卵巢储备功能下降,FSH 升高早于LH 升高,即出现LH 相对降低,可导致基础FSH/LH 比值升高,预示卵巢储备降低、卵巢低反应,可能较bFSH、基础E 2更为敏感。一般认为FSH/LH 比值>3时提示卵巢储备功能及反应性下降,周期取消率增加 [3]。基础FSH/LH 比值升高,LH 水平降低提示卵巢对促性腺激素的反应性下降,在促排卵过程中可适量添加LH。在年龄≥35岁的人群中,基础FSH/LH≥3的女性进行IVF治疗时优胚率和临床妊娠率都会降低。在年龄<35岁的人群中,基础FSH/LH≥3的预测价值不大 [4]。在FSH<10IU/L的人群中,FSH/LH≥2比FSH/LH<2的人群进行IVF时的获卵率、临床妊娠率均显著降低,提示亚临床低卵巢储备,并且激动剂方案比拮抗剂方案有更好的妊娠结局 [5]。FSH/LH 比值对预测IVF周期临床妊娠率的价值还有待研究。
(3)基础E2水平:
指月经第2~3天的血清E 2水平。E 2水平在生育力下降早期保持正常或轻度升高,随着年龄增加、卵巢功能衰退,E 2水平逐渐下降。基础E 2>80pg/ml(293pmol/L),无论年龄与FSH如何,均提示卵泡发育过快和卵巢储备功能下降。基础E 2 水平升高而bFSH 正常的阶段是卵巢储备明显降低的早期,如bFSH 和E 2 水平均升高,提示卵巢储备降低。如基础E 2下降而FSH≥40IU/L提示卵巢功能衰竭。基础E 2>100pg/ml(366pmol/L)时进行IVF会出现因卵巢低反应或无反应而造成的周期取消率升高,临床妊娠率下降。
(4)血清抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)检测:
AMH 随年龄增加而下降,至绝经前和绝经期不能测及,是预测卵巢储备功能的标志物。相对于年龄或其他血生化指标如bFSH、E 2和INH-B等,AMH是反映卵巢储备更好的标志物。AMH是唯一的在月经周期任何时间都能检测的卵巢储备功能指标。目前认为1.15ng/ml(8.21pmol/L)可以作为AMH预测卵巢储备功能降低的阈值,且其有良好的敏感度(80%)和特异度(85%) [6]。ART治疗中,AMH可以预测控制性超促排卵中卵巢的低反应和高反应。但是参考值范围尚无统一标准,AMH的界值在0.99~3.65ng/ml(7.07~26.06pmol/L)的范围内均有报道。国内一项研究显示不同年龄段(20~25岁,25~30岁,30~33岁,33~37岁,37~40岁,40~55岁)AMH中 位 数平均值分布为 6.23ng/ml、5.65ng/ml、4.55ng/ml、3.74ng/ml、2.78ng/ml和1.09ng/ml [7]。国内学者认为,AMH在0.5~1.1ng/ml(3.57~7.85pmol/L)可以作为卵巢低反应的参考范围 [8]。鉴于在临床中仍有部分AMH低水平的妇女获得了妊娠,因此应客观对待AMH的预测价值,不能夸大或过度依赖。AMH受种族、检测试剂盒、吸烟等影响,因此对其准确的预测价值仍需进一步研究确定。
(5)抑制素B:
由窦卵泡的颗粒细胞分泌的内分泌因子INH-B 是一项可直接预测卵巢储备功能的指标。高龄妇女血清FSH可能正常,但其INH-B水平已降低,故INH-B是比FSH更敏感的反映卵巢储备功能的标志物。随年龄增加,INH-B的释放逐渐降低,从而减少对FSH 释放的负反馈调节,导致FSH 逐渐升高,INH-B 与FSH 呈负相关。目前INH-B 尚无统一的检测标准,一般认为<40~56ng/L 提示卵巢储备功能减退 [9]。INH-B 是否能有效预测IVF妊娠结局目前仍存在争议。
3.影像学指标
(1)窦卵泡数目(antral follicle count,AFC):
指早卵泡期阴道超声下检测到的直径<10mm的窦卵泡数目,窦卵泡数在37岁以前以每年4.8%的速度下降,37岁以后则以11.7%的速度下降,AFC 的数目与年龄呈负相关。目前以AFC<5 个作为预示卵巢储备降低的标准。AFC 也可预测bFSH 正常患者的卵巢反应性与妊娠结局。若AFC<2~6 个同时伴bFSH>10IU/L,无论年龄大小,均提示卵巢反应低下、妊娠结局差。陈士岭等认为当AFC<5个时卵巢储备重度降低,AFC为5~7个之间者为卵巢储备功能中度降低,AFC为8~10个之间者为卵巢储备功能轻度降低。任何年龄妇女AFC≤7个或年龄≥38岁而AFC≤10个是卵巢储备降低较为合适的界定指标,若40岁而AFC≤10个,出现卵巢低反应的概率高,AFC结合年龄是评估卵巢储备、预测卵巢反应性的最佳指标 [10]。
(2)卵巢体积:
卵巢体积大小与卵巢内窦卵泡数目有关,卵巢的正常体积为4.0~6.0ml,卵巢体积明显减小者卵巢储备功能下降。体积>3ml提示卵巢反应性好;卵巢体积<3ml提示卵巢储备功能下降。卵巢体积<3ml组的周期取消率为52.8%,卵巢体积>3ml组的周期取消率为8.9%,卵巢体积与卵巢反应不良及周期取消率高有关 [11]。
(3)平均卵巢直径(mean ovarian diameter,MOD):
MOD系任一侧卵巢两个相互垂直平面最大径线的均值,因为测量方法简单易行,可替代卵巢体积的测量,以20mm 作为MOD 的界值,MOD<20mm预示IVF 治疗结局较差 [12]。
(4)卵巢基质内动脉收缩期血流速度峰值(peak systolic velocity,PSV):
PSV低提示卵巢储备功能下降。卵巢基质血流速可能与运送到刺激卵泡生长的靶细胞的促性腺素有关 [13]。
4.刺激试验
(1)氯米芬刺激试验(clomiphene citrate challenge test,CCCT):
检测CC刺激后卵巢的反应能力。卵巢储备功能与反应性正常的女性,其生长发育的卵泡可产生足量的INH-B 和E 2,从而能抑制CC诱发的FSH 水平过度上升。CC 刺激试验操作简单、经济,能有效预测卵巢低反应性,敏感性优于bFSH和卵巢体积等指标 [14]。测定方法为检测月经第3天bFSH及E 2水平,在月经周期第5天开始每天口服CC 100mg持续5天,检测月经周期第10天的血清FSH及E 2水平。若周期第10天FSH≤10IU/L,提示卵巢储备功能良好;FSH 水平>10IU/L 或给药前后血清FSH 之和>26IU/L,为CC刺激试验异常,提示卵巢储备下降和卵巢低反应 [15]。进行CCCT试验FSH>10IU/L时发生不孕症的比值为2.11(95%可信区间,1.04~4.29) [16]。进行CCCT试验时第10天FSH水平升高可以预测低获卵数和低获卵质量,但并不能有效预测妊娠率,对预测其IVF结局的价值有限 [17]。
(2)促性腺激素释放激素激动剂刺激试验(GnRH agonist stimulation test,GAST):
GnRH-a的生物活性为天然GnRH的50~300倍,其与垂体的GnRH受体特异性结合,刺激垂体在短期内释放大量的促性腺激素,使外周血FSH、LH浓度急剧升高,即Flare up作用。在外周血中高浓度的促性腺激素刺激下,卵巢分泌的E 2升高,若卵巢储备功能降低,卵巢内存留的卵泡数量减少,则E 2的合成、分泌减少。GAST能够很好地预测正常月经周期妇女的卵巢低反应性,其准确性与AFC相当。具体方法为月经周期第2~3天检测b E 2水平,随后皮下注射GnRH-a短效制剂1次,24小时后,检测血E 2水平,如较注射前基础值增加1倍或1倍以上者为E 2有反应。如增加不足1倍提示卵巢储备功能降低 [18]。朱明辉等人研究认为GAST能很好地预测卵巢低反应性,但其临床应用价值及预测准确性不及周期第3天AFC和INH-B,并且不能预测妊娠结局 [18]。
(3)促性腺激素刺激试验(exogenous FSH ovarian reserve test,EFORT):
Gn刺激试验包括EFORT和尿促性素(HMG)刺激试验,机制与GAST类似,是临床使用较久的卵巢功能检测试验。刺激试验直接反映卵巢对FSH的敏感性,大剂量FSH作用于卵巢,刺激卵巢内的卵泡合成,分泌E 2,若卵巢储备功能下降,卵巢内存留的卵泡数量减少,质量下降,卵巢对FSH的敏感性下降,则FSH刺激后的E 2上升幅度较小,甚至无改变。具体方法为在月经周期第3天给予重组FSH或HMG 150~300IU,并在FSH给药前、后24小时测量血清E 2水平。若FSH刺激24小时后血清E 2水平的升高<30pmol/L为异常,预示卵巢储备功能下降。EFORT在预测卵巢低反应方面低于CCCT,而在预测卵巢高反应则优于CCCT,但是存在一定的假阳性 [19]。但是有综述认为GAST和EFFORT的预测价值有限,可以摒弃 [16]。
(武学清、匡延平 执笔,黄荷凤 审校)