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第三节 安全防护设备意外事件的应急处置
生物安全实验室会涉及各种不同风险和危害程度的病原微生物实验活动，为确保实验人员和环境安全，需要配置相应的安全防护设备将病原微生物控制在最小范围，防止其和实验人员接触及“逃逸”到实验外周环境中。安全防护设备主要有生物安全柜、负压通风罩、压力蒸汽灭菌器及动物实验室的独立通风笼具(IVC)、换笼机及负压解剖台等。在使用过程中如果发生故障或错误操作，都可能给实验人员和实验环境带来危害和风险。一旦出现这些问题则需要我们按照事前制定的处置流程按部就班地进行处置，防止事态进一步扩大。
一、生物安全柜
（一）排风机故障
一般情况下生物安全柜的送、排风机是联动的，排风机先于送风机开启，而后于送风机关闭，如果排风机没有启动，送风机也就无法启动，但是一旦发生实验室断电，送、排风机联动失效的故障，如生物安全柜在使用过程中发生排风机故障，就会导致生物安全柜内部形成正压，将感染性材料“挤压”到生物安全柜外面，直接威胁实验人员和实验环境的安全，遇到这种情况时应按照以下步骤处置。
1.处置方法
(1)立即切断电源或关闭送风机开关。
(2)将开启的感染性材料的容器(管)盖上盖子，进行密封。
(3)关闭前操作窗玻璃门，更换新的手套。
(4)按规定程序进行报告。
(5)静止30分钟以上。
(6)缓慢打开前操作窗，整理生物安全柜内部的实验物品。
(7)用专用废物袋或容器包装各种实验材料。
(8)对包装容器和包装袋进行外表面消毒后才能拿出生物安全柜。
(9)对生物安全柜操作台面和内壁进行消毒。
(10)按照正常程序退出实验室。
(11)恢复供电后须对实验室内部空间进行消毒。
(12)记录事故处置过程。
(13)分析评价事故发生原因和可能的后果。
(14)进行整改和风险再评估。
2.处置要点
发生排风机故障，处置时应以控制感染性材料外溢为重点，要求做到：立即关闭电源，避免继续送风，造成进一步的外溢，其处置要点如下。
(1)立即关闭安全柜电源开关，防止突然供电带来的风险。
(2)迅速将敞开的感染性材料的容器盖子盖上。
(3)尽可能短时间里关闭生物安全柜的前操作窗的门，静止30分钟以上。
(4)对包装材料外部和生物安全柜内部消毒，清除污染。
3.处置流程
见图4-8。
图4-8 排风机故障处置流程图
（二）感染性物质外溢
在实验操作和样本转运过程中有可能发生感染性材料的泄漏和溢洒，这里主要讨论在生物安全柜内部发生感染性材料的泄漏和溢洒，发生溢洒和泄漏有可能是大量的或少量的，处置要求有所不同。针对不同的溢洒和泄漏，应采取不同的处置要求。
1.少量溢洒或泄漏的处置
当在生物安全柜内操作感染性材料，发生少量感染性材料溢洒或泄漏时，应按照以下方法进行处置。
(1)处置方法：
首先应立即采取有效措施控制污染范围的进一步扩大，用事先准备的沾有消毒剂的纸巾或纱巾覆盖污染区域，然后往纸巾或纱巾上倾倒适量的消毒剂，消毒30分钟，同时向实验室主任报告；然后用镊子等工具，将各种碎片、纸巾或纱巾清理到盛有消毒剂的废液缸里，然后用干的纸巾或纱巾擦干台面上的液体，再用沾有清水的纸巾或纱巾清洗台面，直至干净为止，关闭前操作窗的门，继续紫外消毒30分钟。
记录处置过程，对事故发生原因进行分析总结，采取进一步的预防措施，并重新进行风险评估。
(2)处置要点：
发生泄漏或溢洒，首先应尽快采取措施，防止污染进一步扩大，如果泄漏量较多时，应在覆盖消毒纸巾的同时，倾倒适量的消毒液。
如果使用75%乙醇溶液时，应避免使用明火或电器开关，防止发生爆燃事故。消毒纸巾覆盖消毒至少保持30分钟以上。
(3)处置流程：
见图4-9。
图4-9 少量感染性物质外溢处置流程图
2.发生大量泄漏的处置
当在生物安全柜内操作感染性材料，发生大量感染性材料泄漏，且感染性液体进入生物安全柜后部集液槽里时，应按照以下程序进行处置。
(1)处置方法：
先用沾有75%乙醇消毒液的纸(纱)巾覆盖污染区域，并在纸(纱)巾上倾倒适量的消毒液；对受污染的器具和物品的外表面进行消毒，能浸泡的尽量浸泡消毒；消毒完经包装后拿出生物安全柜，然后再在台面上倾倒一定量的消毒液，直至消毒液灌满集液槽，脱去外层手套，换上新手套，关上生物安全柜前窗的门，关闭风机开关，静止消毒30分钟后，启动风机，打开前窗门，用镊子等工具清理台面上的纸片等碎物；打开生物安全柜集液槽的手动阀，将集液槽中的废液放入废液桶内；用沾有消毒液的纱巾再次擦拭台面和内壁，然后用沾有清水的纸(纱)巾擦拭台面和内壁及集液槽内部，直至干净为止。记录处置过程，事后对事故进行分析评估，提出改进措施。
(2)处置要点：
①立即停止实验活动，迅速控制污染面，防止污染进一步扩散；②应在台面倾倒一定量的消毒剂，直至灌满集液槽进行浸泡消毒，如果使用70%乙醇溶液消毒时，应远离火源，避免启动或关闭设备电源，防止发生爆燃事故。
(3)处置流程：
见图4-10。
图4-10 大量感染性物质外溢处置流程图
（三）高效过滤器泄漏
生物安全柜安装检测后起用，正常情况下高效过滤器一般不会发生泄漏，但当生物安全柜内使用高火焰酒精灯或者使用尖锐器具，更换或移动、维护、消毒过程中可能会损伤高效过滤器，导致感染性材料泄漏，一旦发现这种情况应立即按照以下程序进行处置。
1.处置方法
(1)立即关闭电源。
(2)停止实验操作。
(3)立即将敞开的容器或样本管等进行密闭处置。
(4)向实验室主任报告。
(5)将感染性材料从生物安全柜中取出(外表面消毒)。
(6)对生物安全柜内部、高效过滤器及排风管道进行终末消毒。
(7)更换高效过滤器。
(8)对新的高效过滤器进行完整性检测。
(9)检测合格后再投入使用。
2.处置要点
(1)应停止实验操作。
(2)将敞开的实验材料容器立即盖盖密闭。
(3)应对生物安全柜、高效过滤器及排风管道进行终末消毒，然后再更换新的高效过滤器，并对高效过滤器进行完整性检测，符合要求后才能再次投入使用。应提醒维修人员做好个体防护措施。
3.处置流程
见图4-11。
图4-11 高效过滤器泄漏处置流程图
二、压力蒸汽灭菌器
压力蒸汽灭菌器主要用于固体实验废弃物的消毒灭菌，避免实验室内部感染性因子扩散到实验室外部，避免对实验人员和实验环境的影响。压力蒸汽灭菌器是一种压力容器，使用过程中具有一定的安全风险，如发生爆炸、性能缺陷导致灭菌不彻底造成病原微生物扩散等，因此，应严格按照规定要求使用及维护，灭菌效果的监测以及安全性能检测，确保灭菌效果和防止发生爆炸等安全事故。
压力蒸汽灭菌器发生爆炸
压力蒸汽灭菌器发生爆炸的主要原因有安全阀没有定期检验或测试，发生锈蚀、堵塞，在高压时无法排气泄压；灭菌器控制系统不稳定或压力、温度传感器发生偏离，造成灭菌器长时间超压工作；超期限使用或壁体受损，壁体无法承受设计的压力；使用不符合国家标准的产品等。这些原因都有可能造成使用过程中的安全事故。一般情况下，按照以下程序进行处置。
1.处置方法
实验室一旦发生压力蒸汽灭菌器爆炸事故，首先应立即切断电源，停止压力蒸汽灭菌器的运行，如有人员伤害，应立即组织对受伤人员进行救治，同时立即向实验室主任报告，启动应急预案并保护好现场；如有火情发生，应第一时间向“119”报警，视现场火情情况(具体参见后述“火灾”章节的要求进行处置)在条件允许的情况下对火情进行控制，如果情况紧急，火势无法控制时，应立即撤离实验室；如果没有发生火情和人员伤害，应关闭电源后保护好现场，等待相关人员进场调查取证。现场调查完成后及时清理现场的残留物品；事后应对爆炸发生的原因进行分析评价并采取措施，消除安全隐患，防止同类事故再次发生。
2.处置要点
首先应立即切断电源，防止事故的进一步扩大；确认现场有无人员受到伤害，如有人员受伤，应立即拨打“120”救助电话；如有火情，应立即通过“119”报警，并判断火情是否可以控制，在能控制的情况下，首先采取措施控制火情；如果确定火情无法控制时，人员应立即撤离事故现场；应尽可能保护好现场，为后面的事故调查提供真实原始的现场。
3.处置流程
见图4-12。
三、负压通风柜
负压通风柜(彩图4-13)是一种防护设备，一般用于具有病原体实验操作的实验室。负压通风柜相对于实验室是负压的，气体从实验室向通风柜内部流动，而且排出的空气是经过高效过滤器过滤的，因此，病原因子不会逃逸到柜体外部，也不会污染环境。当操作一些病原因子的实验过程中，需要离心、震荡或超声、混匀，又无法放入生物安全柜进行时，需要将这些设备放在负压通风柜中操作。但是，一旦负压通风柜发生断电、机械故障、高效过滤器发生破损等情况时，病原微生物就有可能逃逸到柜体外面，污染实验环境，造成实验人员感染等风险和事故。
（一）排风机故障
当负压通风柜发生排风机故障时，会导致柜体内的空气无法排到室外(可能含有病原微生物)，并导致病原微生物外溢，污染实验环境，对实验人员产生威胁。其处置方法如下：
1.处置方法
图4-12 压力蒸汽灭菌器发生爆炸处置流程图
(1)立即切断电源。
(2)将开启的感染性材料的容器(管)盖上盖子。
(3)如果有前窗玻璃门的，则立即关闭前操作窗玻璃门，然后更换新的手套。
(4)按规定程序进行报告。
(5)静止30分钟以上。
(6)缓慢打开前玻璃门，整理通风柜内部的实验物品。
(7)用专用废物袋或容器包装各种实验材料。
(8)对包装容器进行外部消毒后拿出。
(9)对负压通风柜操作台面和内壁进行消毒。
图4-13 负压通风柜
(10)按照正常程序退出实验室。
(11)对实验室内部空间进行消毒。
(12)修复排风机。
(13)记录事故处置过程。
(14)分析评价事故发生原因和可能的后果。
(15)进行整改和风险再评估。
2.处置要点
发生排风机故障时，应以控制感染性材料外溢为处置重点，要求做到：一是立即关闭电源，避免继续送风，以免造成进一步的外泄；二是迅速将敞开的装有感染性材料的容器盖子盖上加以密封；三是尽快关闭通风柜的前窗玻璃门；四是对包装材料外部和通风柜内部进行消毒；五是设备去污染后才能进行维修。
3.处置流程
见图4-14。
（二）高效过滤器破损
生物安全柜和负压通风柜的高效过滤器，一般情况下不会发生破损，但是如果在使用过程中发生碰撞，使用明火或遭遇尖锐器具的触碰等就会导致高效过滤器破损，移动柜体时有可能导致高效过滤器密封处出现松动，如果不及时检测，就容易导致病原因子的泄漏，污染环境。如果在实验操作过程中发现高效过滤器破损时，应立即停止实验操作，具体处置方法如下。
1.处置方法
(1)立即关闭电源。
(2)停止离心及混匀等操作。
(3)立即将敞开的容器或样本管等进行密闭处置。
(4)将感染性材料从离心机或混匀器等设备中取出，放入密闭容器。
图4-14 排风机故障处置流程图
(5)向实验室主任报告。
(6)对容器外部和通风柜内部进行消毒。
(7)对通风柜管道和高效过滤器进行消毒。
(8)更换高效过滤器。
(9)对高效过滤器进行完整性检测。
(10)检测合格后，再次使用。
(11)记录整个处置过程。
2.处置要点
一是操作中发现高效过滤器破损，应立即停止实验操作；二是将敞开的实验材料容器立即盖盖密闭；三是应对通风柜操作区域、高效过滤器及管道进行终末消毒，再更换新的高效过滤器(由专业人员进行操作，并做好个体防护)，然后对高效过滤器进行完整性检测，符合要求后才能再次投入使用。
3.处置流程
见图4-15。
图4-15 高效过滤器破损处置流程图