2.2 考研真题详解
一、判断题
1DNA变性是指互补碱基之间氢键断裂。( )[中山大学2017研]
【答案】对
2核酸内切酶能够水解核酸分子内磷酸二酯键,而核酸外切酶则不能。( )[中山大学2017研]
【答案】对
【解析】核酸外切酶是指从核酸链的一端逐个水解下核苷酸的酶,不能水解核酸分子内的磷酸二酯键。
3Hoogsteen配对使Z型DNA得以形成。( )[南开大学2009研]
【答案】错
【解析】在三链DNA中,除正常的Watson-Crick配对之外还存在不寻常的碱基配对现象,人们把三链A(H-DNA)中的非Watsor-Crick配对称为Hoogsteen配对。因此Hoogsteen配对使H型DNA得以形成。
4具有回文序列的单链可形成发卡结构。( )[中国科学技术大学2008研]
【答案】对
5真核染色体是由DNA、RNA和蛋白质组成的。( )[郑州大学2008研]
【答案】对
6有一核酸的两个制剂A、B,A的A260/A280=2.0,B的A260/A280=1.0,因此可判断A比B纯。( )[江南大学2008研]
【答案】对
7用3H胸腺嘧啶只能标记RNA,而不能标记DNA。( )[厦门大学2007研]
【答案】错
【解析】胸腺嘧啶主要存在于DNA中,tRNA中也含少量胸腺嘧啶,所以用3H胸腺嘧啶可以标记DNA,但不能标记RNA。
8在体内存在的DNA都是以Watson-Crick提出的双螺旋结构形式存在的。( )[四川大学2007研]
【答案】错
【解析】正在复制或分裂的DNA双螺旋结构是打开的,所以在体内存在的DNA并不都是以Watson-Crick提出的双螺旋结构形式存在的。
9一个核酸分子由一个磷酸、一个五碳糖、一个碱基组成。( )[哈尔滨工业大学2007研]
【答案】错
【解析】一个核苷酸分子由一个磷酸、一个五碳糖、一个碱基组成。而一个核酸分子由多个核苷酸分子组成。
10由于tRNA的二级结构都很相似,因而它能作为任何氨基酸的载体。( )[华东理工大学2007研]
【答案】错
【解析】虽然tRNA的二级结构都很相似,但是一种tRNA只能携带一种氨基酸,不能转运任何氨基酸,因为tRNA的专一性是由其上的氨酰-tRNA合成酶的高度特异性导致的,而氨酰-tRNA合成酶是高度特异性的,它既要识别特定的氨基酸,又能识别特定的tRNA上的D环,每一种氨基酸至少有一种氨基酰-tRNA合成酶。
11DNA的二级结构模型是右手双螺旋结构,如A、B、C、D型等。( )[沈阳药科大学2006研]
【答案】错
【解析】DNA的二级结构模型大多是右手双螺旋结构,如A、B、C、D型等,但也有左手双螺旋结构,如Z型。
12DNA结构张力的存在是驱使超螺旋形成的动因。( )[武汉大学2005研]
【答案】对
13在环状DNA中,负超螺旋的形成可以使双螺旋的圈数增加。( )[陕西师范大学2005研]
【答案】对
二、填空题
1tRNA三级结构是______形。[中山大学2017研]
【答案】倒L
2Tm是指DNA热变性时候的熔点,双链DNA中若_______含量多,则其Tm值高。[中国科学技术大学2016研]
【答案】GC碱基对
3DNA的变性温度(Tm)的大小与______、______、______等因素有关。[暨南大学2011研]
【答案】DNA的均一性;DNA分子中(G+C)的含量;溶剂的性质
4DNA一级结构测定方法主要有Sanger建立的______和Maxam-Gilbert的______。Sanger法使用了一种特殊底物,称______。[南开大学2009研]
【答案】双脱氧末端终止法;化学法;双脱氧核苷酸
5双链DNA中,如果______含量多,则Tm值高。[华南农业大学2009研]
【答案】G+C
6真核生物核基因的转录分别由3种RNA聚合酶催化,其中RNA聚合酶Ⅰ负责______的转录,RNA聚合酶Ⅱ负责______的转录,RNA聚合酶Ⅲ负责______的转录。[厦门大学2008研]
【答案】45SrRNA前体;mRNA前体和大多数核内小RNA;tRNA
7影响Tm的因素有G—C含量______、______和______。[哈尔滨工业大学2008研]
【答案】溶液的离子强度;溶液的pH;变性剂
8DNA双链变性时,其260nm的光吸收值将______。[中国科学技术大学2008研]
【答案】增加
9tRNA的二级结构为______形,三级结构为______。[西北大学2004、南京师范大学2008研]
【答案】三叶草;倒L
10RNA的二级结构大多数是以单股______的形式存在,但也可局部盘曲形成______结构,典型的tRNA结构是______结构。[华东理工大学2007研]
【答案】多核苷酸链;双螺旋;三叶草
11肿瘤RNA病毒的遗传物质复制时,中间通常是______分子。[中山大学2007研]
【答案】DNA
12核酸的紫外吸收峰在260nm附近,根据260nm与______nm的吸光度的比值可判断核酸纯度;DNA变性后,分子紫外吸收能力______,黏度______,—般来说,DNA分子中G-C含量越______,分子较稳定,融解温度Tm越高;变性DNA在缓慢冷却时,可以复性,此过程称为______。[湖南大学2007研]
【答案】280;升高;降低;高;退火
13______是指分子的一个或多个羟基被氢原子取代的单糖,可在细胞核中参与构成生物大分子______。[北京师范大学2006研]
【答案】脱氧核糖;DNA
14核酸一级结构的碱基序列书写的原则是______。[沈阳药科大学2006研]
【答案】5′→3′
15Polyd(A-T)的Tm值较polyd(G-C)的Tm值______。[西北大学2004研]
【答案】小
三、选择题
1DNA在融解温度时的变化是( )。[西医统考2018研]
A.280nm处的吸光度增加
B.容易和RNA形成杂化双链
C.CG之间的氢键全部断裂
D.50%的DNA双链被打开
【答案】D
【解析】在解链过程中,紫外吸光度的变化ΔA260达到最大变化值的一半时所对应的温度定义为DNA的解链温度(Tm)或融解温度。在此温度时,50%的DNA双链解离成为单链。
2核酸的紫外吸收是由哪一结构所产生的?( )[华中农业大学2017研]
A.嘌呤和嘧啶之间的氢键
B.碱基和戊糖之间的糖苷键
C.戊糖和磷酸之间的酯键
D.嘌呤和嘧啶环上的共轭双键
【答案】D
3关于DNA双螺旋结构的表述,错误的是( )。[西医统考2016研]
A.碱基平面与螺旋轴垂直
B.疏水作用力和氢键维持结构的稳定
C.碱基配对发生在嘌呤和嘧啶之间
D.脱氧核糖和磷酸位于螺旋的内侧
【答案】D
【解析】ABC三项,DNA双螺旋结构中对应的嘌呤和嘧啶之间发生碱基互补配对,碱基对平面与双螺旋结构的螺旋轴垂直。相邻的两个碱基对之间产生的疏水作用力和互补链之间碱基对的氢键共同维系结构的稳定。D项,脱氧核糖和磷酸基团构成的亲水性骨架位于双螺旋结构的外侧。
4能使外源性侵入基因表达的mRNA降解的核酸是( )。[西医统考2015研]
A.snRNA
B.hnRNA
C.siRNA
D.scRNA
【答案】C
【解析】A项,核内小RNA(snRNA)位于细胞核内,参与hnRNA的剪接和转运。B项,hnRNA(不均一核RNA)是mRNA的未成熟前体。C项,小干扰RNA(siRNA)是生物宿主对于外源侵入基因表达的双链RNA进行切割所产生的具有特定长度和特定序列的小片段RNA,这些siRNA可以单链形式与外源基因表达的mRNA相结合,并诱导相应mRNA降解。D项,胞质小RNA(scRNA)存在于细胞质中,参与形成信号识别颗粒,引导含有信号肽的蛋白质进入内质网定位合成。
5DNA复性的重要标志是( )。[华南农业大学2009研]
A.溶解度降低
B.溶液黏度降低
C.紫外吸收增大
D.紫外吸收降低
【答案】D
6预测下列哪种基因组在紫外线照射下最容易发生突变?( )[南京大学2008研]
A.双链DNA病毒
B.单链DNA病毒
C.线粒体基因组
D.叶绿体基因组
【答案】B
7将RNA转移到硝基纤维素上进行杂交的技术叫( )。[南京师范大学2008研]
A.Southern blot
B.Nortbern blot
C.Western blot
D.RNAi
【答案】B
8各类核糖核酸中,稀有核苷酸含量百分比最高的是( )。[江南大学2007研]
A.tRNA
B.5srRNA
C.mRNA
【答案】A
9Watson-Crick的DNA双链螺旋结构模型表示( )。[厦门大学2007研]
A.DNA的两条链走向相反
B.碱基A和G配对
C.碱基之间共价结合
D.磷酸-戊糖骨架位于DNA螺旋内侧
【答案】A
10决定双链DNA有较高解链温度的因素是( )。[哈尔滨工业大学2007研]
A.嘌呤含量高
B.嘧啶含量高
C.AT含量高
D.GC含量高
【答案】D
11有关RNA的描写哪项是错误的?( )[湖南大学2007研]
A.mRNA分子中含有遗传密码
B.tRNA是分子量最小的一种RNA
C.胞浆中只有mRNA
D.RNA可分为mRNA、tRNA、rRNA
E.组成核糖体的主要是rRNA
【答案】C
12DNA的基本结构单位是( ) 。[沈阳药科大学2006研]
A.碱基
B.戊糖
C.磷酸
D.脱氧核苷酸
【答案】D
13下面是关于双螺旋DNA结构和性质的有关叙述,正确的是( )。[武汉大学2005研]
A.DNA的碱基组成具有A/G=T/C的关系
B.AT含量为35%DNA的解链温度小于AT含量为65%DNA
C.Cot1/2的大小可作为DNA序列复杂性的指标
D.当DNA复性时,它的紫外吸收增高
【答案】C
14下列单链DNA中,可以与序列5′-TACGATCATAT-3′的DNA单链互补的是( )。[西北大学2004研]
A.3′-TACGATCATAT-5′
B.3′-ATGCTAGTATA-5′
C.3′-AUGCUAGUAUA-5′
D.3′-GCATATACGCG-5′
E.3′-TATACTAGCAT-5′
【答案】B
15(多选)关于DNA的碱基组成,正确的是( )。[华东理工大学2007研]
A.腺嘌呤与鸟嘌呤分子数相等,胞嘧啶与胸嘧啶分子数相等
B.不同种属DNA碱基组成比例不同
C.同一生物的不同器官DNA碱基组成不同
D.年龄增长但DNA碱基组成不变
【答案】BD
16(多选)能参与切割mRNA的生物分子包括( )。[西医统考2015研]
A.miRNA
B.siRNA
C.5.8S rRNA
D.tRNA
【答案】AB
【解析】A项,微RNA(miRNA)主要是通过结合mRNA而选择性调控基因的表达。B项,小干扰RNA(siRNA)可以单链形式与外源基因表达的mRNA相结合,并诱导相应mRNA降解。C项,5.8S rRNA主要参与构成真核生物的大亚基。D项,tRNA的主要功能是运送氨基酸。
17(多选)高等真核生物的基因( )。[上海交通大学2007研]
A.大部分是连续的
B.外显子间被内含子所间隔
C.内含子在初级转录物中已被除去
D.进化中外显子重组产生新的蛋白
E.一个外显子经常编码蛋白的一个结构(功能)域
【答案】BDE
四、名词解释
1限制性核酸内切酶(Restriction endonuclease)[华中科技大学2016研]
答:限制性核酸内切酶是指可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶,简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(TypeⅠ)、第二型(TypeⅡ)及第三型(TypeⅢ)。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。Ⅲ型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。
2增色效应(Hyperchromic Effect)[中国科学技术大学2016研]
答:增色效应是指与天然DNA相比,变性DNA因其双螺旋结构破坏,使得碱基充分暴露,因此其在260nm处紫外吸收增加的现象。一般以260nm波长下溶液的紫外吸收作为观测此效应的指标,DNA变性后该指标的通常较变性前有明显增加,但不同来源DNA的变化不一。
3核酸的变性与复性[东北师范大学2008研]
答:核酸的变性是指核酸双螺旋区的氢键断裂,变成单链结构的过程。变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。能够引起核酸变性的因素很多。温度升高、酸碱度改变、甲醛和尿素等的存在均可引起核酸的变性。
复性是指变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构的过程。DNA复性后,一系列物理、化学性质将得到恢复。DNA复性的程度、速率与复性过程的条件有关。
4核酸分子杂交[四川大学2007研]
答:核酸分子杂交是指具有碱基互补序列的不同来源的单链核酸分子,通过退火复性后,碱基互补的区段能够按照碱基配对原则结合形成双链核酸分子的过程。杂交过程可以发生 DNA与DNA、RNA与RNA以及DNA与RNA之间。
5Tm值[郑州大学2007研]
答:Tm值即解链温度(Tm)或融解温度,是指解链过程中50%的DNA双链被打开时所对应的温度。不同序列的DNA Tm值不同。Tm值的大小与DNA长短、碱基的GC含量成正比。
6Chargaff规则[湖南大学2007研]
答:Chargaff规则是有关DNA分子中碱基组成的规则:①所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔数相等(A=T),鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔数相等(G=C),含氨基的碱基总数等于含酮基的碱基总数(A+C=G+T),嘌呤的总数等于嘧啶的总数(A+G=T+C);②DNA的碱基组成具有种的特异性,但没有组织和器官的特异性;③生长发育阶段、寄养状态和环境的改变都不影响DNA的碱基组成。
7C值悖论[山东大学2006研]
答:在每一种生物中其单倍体基因组的DNA总量是特异的,被称为C值(C Value)。DNA的长度是根据碱基对的多少推算出来的。各门生物存在着一个C值范围,在每一门中随着生物复杂性的增加,其基因组大小的最低程度也随之增加。高等生物具有比低等生物更复杂的生命活动,所以,理论上应该是它们的C值也应该更高。但是事实上C值没有体现出与物种进化程度相关的趋势。高等生物的C值不一定就意味着它的C值高于比它低等的生物。这种生物学上的DNA总量的比较和矛盾,称为C值悖论。
8nucleosome[中国药科大学2006研]
答:核小体,是真核染色体的基本结构单位。染色质中的DNA双螺旋链等距离缠绕组蛋白八聚体形成众多核心颗粒,各颗粒之间为带有H1组蛋白的连接区DNA。这种组成染色质的重复结构单位就是核小体。
9氨基酸臂和反密码子环[北京师范大学2005研]
答:RNA的二级结构呈三叶草形,氨基酸臂和反密码子环是其中两部分。其中,氨基酸臂由7对碱基组成,富含G,末端为CCA,接受活化的氨基酸;反密码子环由7个核苷酸组成,环中部为反密码子,由3个碱基组成。次黄嘌呤(I)常出现于反密码子中,反密码子环通过5对碱基组成的双螺旋区(反密码子臂)与tRNA部分相连,反密码子可识别信使RNA 的密码子。
五、问答题
1简述原核生物和真核生物的mRNA在结构上的主要区别。[华中师范大学2010研]
答:原核生物和真核生物的mRNA结构上的主要区别如下所示:
(1)原核生物的mRNA是多顺反子,真核生物的mRNA是单顺反子。
顺反子是通过顺反测验鉴定的遗传功能单位,相应于一个多肽链的DNA顺序加上翻译的起始和终止信号,也就是一个多肽链的基因。典型的原核生物mRNA是由多顺反子转录来的,可编码几条不同的多肽链,故称为多顺反子mRNA,如大肠杆菌的乳糖操纵子中三个结构基因转录成一条多顺反子mRNA。多顺反子mRNA的5′端和3′端都有非编码区,编码区之间也有非编码的间隔区,间隔区长短不一;每个编码区都有自己的起始密码子和终止密码子。目前研究过的真核生物mRNA都是单顺反子,只编码一条多肽链,其5′端和3′端也各有一段非编码区。
(2)极大多数真核细胞mRNA在3′-末端有一段长约200个核苷酸的poly A。
poly A是在转录后经poly A聚合酶的作用而添加上去的。poly A聚合酶对mRNA专一,不作用于rRNA和tRNA。原核生物的mRNA一般无3′-polyA,但某些病毒mRNA也有3′-poly A。poly A可能有多方面功能:与mRNA从细胞核到细胞质的转移有关;与mRNA的半寿期有关,新合成的mRNA,poly A链较长,而衰老的mRNA,poly A链缩短。
(3)真核细胞mRNA 5′-末端还有一特殊结构5′-m7G-5′ppp5′-Nm-3′-P,称为5′-帽子。mRNA的5′-末端的鸟嘌呤N7被甲基化。鸟嘌呤核苷酸经焦磷酸与相邻的一个核苷酸相连,形成5′,5′-磷酸二酯键。目前认为5′-帽子结构的功能是:
①封闭mRNA的5′端,使其没有游离的5′-磷酸,这种结构有抗5′-核酸外切酶降解的作用,使mRNA更稳定;
②作为mRNA与核糖体结合的信号,无帽子结构的mRNA不能与核糖体的40S亚基结合;
③可能与蛋白质合成的正确起始作用有关,帽子结构附近区域能形成发荚结构,缩短了帽子结构与起始密码子之间的空间距离,因此推测帽子结构可能是蛋白质合成的起始辨认信号的一部分。某些真核细胞病毒也有5′-帽子结构。
2为什么双链的DNA比单链的RNA更适合充当遗传信息的储存者?[中山大学2009研]
答:(1)作为遗传信息的储存者必须具备的条件:①在细胞生长和繁殖的过程中能够精确地自我复制;②能够指导蛋白质的合成从而控制生物的性状和新陈代谢;③具有贮存巨大数量遗传信息的潜在能力;④结构比较稳定,但在特殊情况下又能突变,而且突变以后还能继续复制,并能遗传给后代。
(2)双链的DNA比单链的RNA更适合充当遗传信息的储存者的原因:由于DNA分子为双螺旋结构,碱基之间由氢键连接,使它的热稳定性增强,抗环境变化能力增强,且其双链结构使得生物体可以通过两条碱基互补反向平行的链精确地指导DNA复制,不易产生变异。而RNA一般为单链,具有不稳定性,容易变异,不能保证这种精确的信息传递。所以双链的DNA比单链的RNA更适合充当遗传信息的储存者。
3脱氧核糖核酸(DNA)的Waston-Crick模型有哪些基本特征?通常介绍的DNA的构象有哪几种类型?[郑州大学2008研]
答:(1)DNA的Watson-Crick双螺旋结构的基本特征:
①两条反向平行的多核苷酸链绕同一中心轴相互缠绕,形成右手双股螺旋。
②嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧;磷酸与脱氧核糖在外侧,彼此通过3′,5′-磷酸二酯键相连接,构成DNA分子的骨架。
③碱基平面与纵轴垂直,糖环平面与纵轴平行。
④双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻的碱基对之间的高度距离为0.34nm,沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸,螺距为3.4nm。
⑤两条DNA链相互结合以及形成双螺旋的力是链间的碱基对所形成的氢键。碱基的相互结合具有严格的配对规律,碱基互补,A=T,G=C。
⑥碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制,但一条多核苷酸的序列被确定后,即可确定另一条互补链的序列。表明遗传信息由碱基的序列所携带。
(2)通常介绍的DNA构象有:
①A-DNA:DNA钠盐、钾盐或钙盐在75%的相对湿度下可形成A型结构,它也是右手螺旋,但碱基略有倾斜(19度),螺距和骨架结构也稍有不同,每匝11个碱基对,短粗。其生物学意义在于它与双链RNA及DNA-RNA杂合体在溶液中的构象极其相似。由于2′-羟基的存在,RNA不易采取B型构象,所以在转录时,DNA要采取A型构象。一些有机溶剂和蛋白质可将B型DNA变成A型构象。
②B-DNA:即Watson-Crick描述的双螺旋结构DNA构象。
③Z-DNA:为左手螺旋,其骨架呈锯齿走向,在嘌呤与嘧啶交替排列的寡聚DNA中发现,也是反平行互补的双螺旋,每匝12个碱基对,螺旋细长。Z-DNA作为特殊的结构标志,与基因表达的调控有关。
4有一份核酸样品,可能含有少量蛋白质,只允许测定一种元素即可确定其有无蛋白质污染,您选哪一种元素,为什么?[江南大学2008研]
答:我选检测硫元素。因为要确定有无蛋白质污染,只须测定样品中是否含有只存在于蛋白质而不存在于核酸的元素,如果样品中有此元素存在,很明显说明存在蛋白质污染。满足此条件的是硫,核酸一般不含S,而大多数蛋白质含有S。
5一个生物的基因组DNA之GC含量决定了该基因组DNA的变性温度,是为适应生存环境的演化结果。试问,什么样的生物需要高GC含量的基因组DNA,又是什么样的生物需要高AT含量的基因组DNA?[复旦大学2008研]
答:(1)需要高GC含量的基因组DNA的生物:DNA的稳定性是由氢键和碱基堆积力维持的,G和C之间具有三个氢键,比仅具有两个氢键的AT要稳定,GC含量越高,Tm值越高,基因组DNA稳定,越难发生变性,所以嗜热菌(生活在高温环境的微生物)需要高GC含量的基因组,则其DNA会采取高GC的形式。
(2)需要高AT含量的基因组DNA的生物:AT之间只有两对氢键,AT含量高的双螺旋解链要比GC含量高的双螺旋解链容易。所以,如果某种生物生长繁殖旺盛,基因组需要快速大量的复制和转录,那么这种生物基因组DNA就会倾向于采取高AT含量的形式。另外AT含量高,Tm值低,嗜冷菌(在0℃至20℃之间最适宜生长)不需要高GC含量的基因组,则其DNA也会采取高AT的形式。
6简述DNA双螺旋的结构特点。[厦门大学2008研]
答:DNA双螺旋的结构特点是:
(1)DNA由两条反向平行的多聚脱氧核苷酸链组成,为右手螺旋,螺旋直径为2.37nm,螺距为3.54nm;
(2)由脱氧核糖和磷酸基团构成的亲水性骨架位于双螺旋结构的外侧,疏水的碱基位于内侧;
(3)DNA双链之间形成了互补碱基对,A与T相配对,形成两2个氢键;G与C相配对,形成3个氢键;
(4)每一个螺旋平均有10.5个碱基对,每两个碱基对之间的相对旋转角度为36°,相邻碱基平面距离为0.34nm;
(5)碱基对的疏水作用力(碱基堆积力)和氢键共同维系DNA双螺旋结构的稳定,前者的作用更重要。
7用分光光度法测定生物分子含量的原理是什么?为何有些物质需要用可见分光光度计,而有些要用紫外分光光度计?写出用分光光度法测定淀粉酶中蛋白质含量的方法步骤。[东北师范大学2008研]
答:(1)分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的一项技术,其基本原理是Lambert-Beer定律(光吸收定律),即一定温度下,一定波长的单色光通过均匀的、非散射的溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。所以可通过测量溶液的吸光度来求得被测组分的含量。
(2)可见分光光度计的应用波长范围为400~850nm的可见光区,紫外分光光度计的应用波长范围为200~400nm的紫外光区。由于各种物质吸光度不一样,有些物质的吸光度在可见光区,则要用可见分光光度计;有些物质的吸光度在紫外光区,则要用紫外分光光度计。
(3)方法步骤:
①稀释淀粉酶蛋白质溶液。准确吸取0.1mL淀粉酶蛋白质,置于50mL容量瓶中,用蒸
馏水稀释至刻度(即500倍)。
②测定光密度。在紫外分光光度计上,将稀释的蛋白质溶液倒入石英比色杯中,用生理盐水作对照,测得280nm和260nm两个波长的光密度。
③计算蛋白质含量。将测得280nm和260nm波长的光密度值按经验公式:蛋白质浓度(mg/mL)=1.45D280-0.74D260,计算蛋白质浓度,再根据溶液体体积计算出蛋白质含量。
8按核酸碱基互补原则,举两个例子说明其在实验中的应用。[沈阳药科大学2006研]
答:(1)Southern印迹(Southern blotting),将凝胶电泳分离的DNA片段转移、吸附、固定在薄膜上,用标记的探针与膜上的DNA片段杂交、显影,以确定分离的哪个DNA片段能与探针杂交的方法。
(2)PCR。聚合酶链式反应又称基因体外扩增特定序列方法。它是体外有引物介导的特定DNA序列的酶扩增。可将pg水平的DNA特异性扩增100万倍,而达到μg水平。
9DNA双螺旋结构的发现的实验依据有哪些?为什么DNA适合作为遗传物质?[山东大学2005研]
答:(1)实验依据主要有DNA的碱基组成具有生物种的特异性、Cargaff规则、DNA的X射线晶体衍射实验等。
(2)DNA之所以适合作为遗传物质,是因为DNA具有如下特性:
①稳定性。每一种核酸由三个部分所组成:一分子含氮碱基+一分子五碳糖(脱氧核糖)+一分子磷酸根。该框架很稳定,并且DNA分子为双螺旋结构,碱基之间由氢键连接,A和T,C和G之间的作用力很强,不易打开。
②特异性。DNA碱基组成具有物种特异性,不同物种的DNA有其独特的碱基组成,而且不同组织和器官的DNA碱基组成是一样的,不受生长发育营养状况以及环境条件的影响。
③精确的自我复制。这是作为遗传物质的一大基础。既然说是遗传物质,那就是把遗传信息传给下一代,这是通过DNA复制和遗传给下一代实验的。
④能够指导蛋白质合成。遗传信息传给下一代后需要能够表达。DNA是通过转录和翻译合成蛋白质的。密码子是DNA含有的信息和蛋白质的信息的连接点。
⑤能产生变异。如果从进化的角度来讲,这一点很重要。产生突变是进化的基础。
10一个单链DNA和一个单链RNA分子量相同,试述可以用几种方法将它们区分开?[天津大学2002研]
答:(1)用专一性的DNA酶和RNA酶分别对两者进行水解。
(2)用碱水解。RNA能够被水解,而DNA不被水解。
(3)进行颜色反应。二苯胺试剂可以使DNA变成蓝色;苔黑酚(地衣酚)试剂能使RNA变成绿色。
(4)用酸水解后,进行单核苷酸分析(层析法或电泳法),含有U的是RNA,含有T的是DNA。