29.怎么进行牛病料的采集和保存?
(1)病料的采集方法
① 液体材料的采集。一般用棉棒采集破溃的脓汁、胸水、鼻液、阴道分泌物(图1-16)、排泄物。采集未破的脓肿时,将表面消毒后,用注射器抽取,也可用吸管吸取,汁液置于试管中。血液可从静脉采集。若是突然死亡或病因不明致死时,须先采集末梢血液制成涂片,镜检,疑似炭疽时,需进行剖检。
图1-16 采集阴道分泌物
② 实质器官的采集。应在刚解剖尸体后立刻采集。若剖检过程中污染了被检器官,或剖开腹腔后时间过久,应先用烧红的刀片烧烙表面,在烧烙的深部切取小块器官,放在灭菌试管或培养皿内。或直接用铂耳挑取病料涂抹于平板培养基上。常采集的脏器有肝、脾、肾、心、肺、淋巴结等。
③ 胃肠及其内容物的采集。除去粪便的肠管,水洗后放在平皿内(图1-17,见彩图)。粪便应采集新鲜的带有脓、血、黏液的部分,液态粪便应采集絮状物。有时可将胃肠剪下,两端结扎好,送往实验室(厌氧菌培养时)。
图1-17 溃疡肠段图
④ 胎儿。可将流产胎儿送往实验室,也可用吸管或注射器吸取胎儿内容物放在试管内。
(2)病料采集注意事项
① 取被检病料时应采用无菌操作技术,所用器械、器皿都须经过灭菌(图1-18)。在抽取血液或其他液体时,要避免外源性污染。取得材料后,应立即送往实验室检查。
图1-18 高温高压消毒
② 动物死亡后应立即采集病料,不能拖延时间,夏天应在4~8小时内,冬天应在24小时之内。而且应采集病原菌最多的部位或脏器。病料量不宜过少,用合适的容器盛装,避免在送检途中细菌干燥死亡等情况的发生。
③ 送检的病料如体液、尿液、脓汁、鼻液等首先应做涂片检查(图1-19),再根据情况采用分离培养等其他检验方法。
图1-19 涂片检查
④ 人畜共患病在取样和送检途中,应严格要求,以免工作人员被传染。
(3)牛常见细菌性传染病取样部位
① 炭疽。取样时,严禁剖检尸体,应立即从耳尖采血涂片染色镜检。必要时在严格控制的条件下,从尸体左侧最后一条肋骨后缘打开腹腔,采集小块脾脏涂片染色镜检,腹腔切口用浸透碘酊的纱布填塞。皮肤炭疽可采集病灶水肿液渗出物,肠炭疽可采集粪便。
② 布鲁菌病。最好采集流产胎儿的胃内容物、羊水及胎盘的坏死部分。如无此材料,也可用母牛阴道分泌物、乳汁或尿液。
③ 巴氏杆菌病。尽可能采集新鲜病料,如渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等,制成涂片,以免镜检时细胞碎片混淆视线。
④ 结核病。采集患病动物的病灶、痰液、尿液、粪便、乳汁及其他分泌物。
⑤ 副结核病。已有临床症状的病牛,可刮取直肠黏膜或取粪便中的小块黏膜及血液凝块,尸体可取回肠末端与附近肠系膜淋巴结,或取回盲瓣附近的肠系膜。
⑥ 放线菌病。采集病灶脓汁。
(4)被检材料的保存方法 供细菌检验的被检材料,如能立即送往实验室并有条件立即展开工作的,最好立即对病料进行分析。若须在1~2天内送到实验室,可暂放在有冰的保温瓶或冰箱内,也可放入灭菌液体石蜡或30%甘油生理盐水中。还可在保温瓶内放氯化铵500克加1500毫升水,使保温瓶内保持0℃左右达24小时。送到实验室暂且不能检查的病料,也要放置冰箱中待检。
供细菌检验用的被检材料,应尽可能地保证其中的细菌数量和活力不发生变化。最好由专人送检,并记录有关的详细情况,如病情、剖检、采集时间和部位等,以供检验人员参考。